I. Thông tin về vi khuẩn Listeria spp

– Listeria là một vi khuẩn gram dương, vận động (ở điều kiện mesophilic), vi khuẩn loạn thần với sáu loài được biết đến gồm có Listeria monocytogenes, Listeria innocua, Listeria seeligeri, Listeria welshimeri, Listeria ivanovii và Listeria grayi.

– Chúng có ảnh hưởng đến tầm quan trọng lâm sàng do hoạt động độc lực của chúng. Nhưng trong số sáu loài Listeria, phổ biến nhất là Listeria monocytogenes gây bệnh listeriosis bao gồm nhiễm trùng huyết, viêm màng não, viêm não, loét giác mạc, viêm phổi, nhiễm trùng cổ tử cung và phá thai, trong đó người già, phụ nữ bị suy giảm miễn dịch.

– Do sự bùng phát Listeria ngày càng tăng, một số loại thực phẩm có nguy cơ cao trở nên cần thiết để kiểm tra sự nhiễm vi khuẩn Listeria.

– Những thực phẩm có nguy cơ cao như sau: hải sản ăn liền, trái cây và rau quả đóng gói sẵn, đồ uống làm từ trái cây tươi, thịt nguội, sữa chưa tiệt trùng, kem, pho mát mềm, salad và rau sống.

- Vì lẽ đó, quy trình kiểm nghiệm và phát hiện Listeria được khuyến nghị, và đĩa Compact Dry Listeria của hãng Nissui mang đến sự tiện lợi cho người sử dụng bởi ưu điểm không cần chuẩn bị hóa chất môi trường, dụng cụ, vật tư tiêu hao phức tạp.

– Tất cả công nghệ được sử dụng cho đĩa Compact Dry Listeria này là môi trường được đổ sẵn. Và người sử dụng chỉ cần trích ly mẫu, nhỏ mẫu vào đĩa và đem đi ủ.

2. Ưu điểm khi sử dụng đĩa Compact Dry Listeria spp.

– Quy trình đơn giản dễ sử dụng, không cần chuẩn bị vật tư tiêu hao hay thiết bị phức tạp.
– Dễ dàng sử dụng và không mất thời gian đào tạo người sử dụng.
– Đĩa compact dry có thể bảo quản dễ dàng nhờ quy cách đóng gói 4 đĩa 1 gói.
– Kết quả khá chính xác, dễ phân tích và có kết quả sau 24 giờ.
– Có thể tách lấy khuẩn lạc để test sinh hóa.

3. Quy trình kiểm nghiệm trên đĩa Compact Dry Listeria spp.

3.1. Chuẩn bị đĩa Compact dry

– Mở túi nhôm ra

– Lấy ra một bộ gồm 4 đĩa hoặc lấy 1 – 3 đĩa mà bạn cần và giữ cho túi kín để tránh mất chất lượng do ánh sáng và độ ẩm.

– Viết thông tin thích hợp vào phần ghi chú.

3. 2. Chuẩn bị mẫu kiểm tra Listeria

* Đối với mẫu nước và mẫu thực phẩm lỏng

Nhỏ 1 ml mẫu (pha loãng nếu cần thiết) ở giữa đĩa Compact dry LS.  Mẫu tự động khuếch tán và biến đổi môi trường đông khô thành dạng gel trong vài giây.

* Đối với mẫu nước và mẫu thực phẩm rắn

- Cân 25 g từ mỗi mẫu.
- Thêm 225 ml Buffered Peptone Water (BPW) vào và đồng nhất bằng máy dập mẫu trong 2 phút. Nhỏ 1 ml mẫu (pha loãng nếu cần thiết) ở giữa đĩa Compact dry LS

* Đối với mẫu nước và mẫu môi trường – swab test

- Sử dụng swab để quét mẫu bề mặt, cho vào ống chứa Buffered Peptone Water (BPW)

- Nhỏ 1 ml dung dịch swab (pha loãng nếu cần thiết) vào giữa đĩa Compact dry LS

3.3. Ủ mẫu

Lật cái đĩa đã đậy lại đặt chúng vào tủ ấm. Ủ trong 24 ± 2giờ ở 35 ± 1 ° C

Diễn giải kết quả

Từ mặt sau của đĩa compact dry, đếm số lượng khuẩn lạc có màu lam / xanh lam nhạt có đường kính 1 ~ 2 mm. Bật đèn và sử dụng kính lúp giúp ích cho việc đếm các khuẩn lạc dễ dàng hơn.

Khẳng định Listeria spp. :

Cấy khuẩn lạc lên TSYEA và ủ trong 16 – 24 giờ ở 35 độ C hoặc 37 độ C;

– Thực phản ứng -catalase;

– Nhuộm Gram;

– Kiểm tra tính di động (nếu cần).

Khẳng định Listeria monocytogenes:

– Thử khả năng tan huyết;

– Thử khả năng sử dụng carbohydrate;

* Quy trình thao tác đĩa Compact Dry LS Listeria spp. được mô tả bằng hình ảnh như sau:

* Chú ý:

- Cần pha loãng mẫu nếu số lượng khuẩn lạc >300 CFU

- Đĩa sau khi đọc kết quả được hấp bỏ tiệt trùng (1210C/ 30phút) trước khi loại bỏ.